Actividad de anticuerpos policlonales igy a partir de gallinas inmunizadas dirigidos contra el veneno de tityus caripitensis, tityus breweri y bothrops atrox

Abstract

El uso de anticuerpos para investigación y diagnóstico se realiza desde hace varias décadas en todo el mundo y en los últimos años se han utilizado cada vez con mayor frecuencia anticuerpos purificados a partir de gallinas inmunizadas. Actualmente existen numerosas publicaciones que avalan su efectividad. Hasta ahora, en Venezuela, no se han obtenido IgYs de gallinas inmunizadas simultáneamente con veneno de escorpiones y ofidios, y mucho menos usando venenos de animales del oriente-sur del país. Métodos: Se realizó un estudio observacional descriptivo, experimental, evaluativo. Con una muestra de 105 huevos de un universo de 1278 huevos de 5 gallinas inmunizadas en 4 fases, durante 10 meses con el veneno completo de T. caripitensis, T. breweri y B. atrox; donde el primer grupo fue inmunizado solo con el veneno completo de los escorpiones (A1 y A2), el segundo con el veneno de ofidio (B1 y B2) y la quinta gallina (C) con una mezcla de los tres. Se utilizaron los métodos de purificación del PEG-6000, el método de Elisa indirecto, Electroforesis, Multiple Antigen Blot Assay (MABA) y el Microbradford. Resultados: La producción de IgY arrojó lecturas de absorbancia a 540µm en el espectrofotómetro que oscilaban entre 0,120 hasta 1,235, reconociendo los antígenos que indujeron su producción e incluso a otros de distinta especie; el día pico de producción de inmunoglobulinas para los huevos A1, A2 y C fue el sexto posterior a la cuarta inmunización (reto), mientras que para los huevos B1 y B2 fue el día 6 del mismo período, obteniéndose una concentración de proteínas mínima fue de 4,71mg/dl y la máxima 9,78mg/dl, ajustándose a los rangos expuestos por otros autores. La capacidad de reconocimiento de las inmunoglobulinas evidenciada por MABA ante antígenos distintos fue exitosa. Conclusiones: Se logró la producción de inmunoglobulinas aviares a partir de venenos de T. caripitensis, T. breweri y B. atrox. Existe reactividad cruzada importante entre las inmunoglobulinas aviares del veneno crudo de B. atrox y el veneno crudo de T. caripitensis, T. breweri, T. quirogae y C. durissus .Este trabajo representa la primera investigación a nivel mundial que relaciona la actividad cruzada de dos especies filogenéticamente distintas, a la familia Buthidae con la familia Viperidae en el uso de la tecnología IgY como tratamiento para estos envenenamientos.